求助怎么设计mirna引物及探针..._引物与探针_其他分子产品_分子类_知道

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游客	收藏 \| 举报 2018-03-24 16:03 关注：261 回答：1 求助怎么设计mirna引物及探针... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-04-20 11:37 求助怎么设计mirna引物及探针

游客

举报 2017-02-16 00:00

miRNA引物设计（茎环法+染料法检测）

设计方法：通用茎环后端加miRNA后面6个碱基的反向互补序列为反转录引物，正向引物为miRNA去除后面6个碱基的序列，反向引物在茎环上。

反转录茎环通用序列：

GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGAC

miRNA序列：

>mmu-miR-99b-5p
MIMAT0000132 Mus musculus miR-99b-5p

CACCCGUAGAACCGACCUUGCG

mmu-miR-99b-5p反转录颈环引物为：

GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACCGCAAG

定量PCR反向引物为：TGTCGTGGAGTCGGC

正向引物为：CACCCGTAGAACCGAC