• 游客
收藏 | 举报 2017-10-02 11:00   关注:98   回答:1

转染后,荧光消失快,g418不能维持荧光表达,怎么筛选稳定细...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-04-30 06:28
转染后,荧光消失快,g418不能维持荧光表达,怎么筛选稳定细胞系

我来回答
  • 游客
举报 2017-10-10 13:19
瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,存在于游离的载体上,不整合到细胞的染色体上,结果是短暂的高水平表达,可在外源基因导入细胞24~96h内检测表达效果,表达水平与位置无关,不会受到周围染色体元件的影响。超螺旋质粒转染更倾向于瞬时表达。
对于瞬时转染的检测:如果有报告基因,就通过报告基因的表达看转染成功与否;没有报告基因的话,就在24~96h内收获细胞通过RT-PCR和WB来鉴定。