• 游客
收藏 | 举报 2005-08-19 11:25   关注:190   回答:2

【求助】如何克隆基因的全长编码序列...

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【求助】如何克隆基因的全长编码序列

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  • 游客
举报 2005-08-23 02:20
1.上NCBI网站差该基因的cDNA序列,当然还有物种区别,比如你要克隆人的基因,就查人的该基因的cDNA序列,
2.然后设计该基因的上下游引物。
3.提取该种组织的RNA,可用Trizol法
4.反转录成cDNA,
5.利用反转录的cDNA为模板,PCR扩增目的基因,
6.将其克隆到载体上。
大致思路是这样的,当然,还有很多细节,遇上再说。
还是在NCBI网站上有。
  • 游客
举报 2005-08-22 19:48
我也做的和你的差不多,也是要克隆一个基因,请问扩增出来的怎么知道是全长呢?而且怎么知道克隆的就是你想要的东西?