• 游客
收藏 | 举报 2018-02-04 16:30   关注:162   回答:3

20mM磷酸盐缓冲液的配制方法(破碎蛋白时用的)...

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20mM磷酸盐缓冲液的配制方法(破碎蛋白时用的)

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  • 游客
举报 2018-02-05 13:35
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)

试剂: NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O

配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。

(1)0.2mol/L的 Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

(2)0.2mol/L的 Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。

0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)

pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml)

5.7 93.5 6.5

5.8 92.0 8.0

5.9 90.0 10.0

6.0 87.7 12.3

6.1 85.0 15.0

6.2 81.5 18.5

6.3 77.5 22.5

6.4 73.5 26.5

6.5 68.5 31.5

6.6 62.5 37.5

6.7 56.5 43.5

6.8 51.0 49.0

6.9 45.0 55.0

7.0 39.0 61.0

7.1 33.0 67.0

7.2 28.0 72.0

7.3 23.0 67.0

7.4 19.0 81.0

7.5 16.0 84.0

7.6 13.0 87.0

7.7 10.5 89.5

7.8 8.5 91.5

7.9 7.0 93.0

8.0 5.3 94.7
  • 游客
举报 2018-02-12 11:15
38ml 0.2M NaH2PO4
62ml 0.2M Na2HPO4
混合得到0.2M pbs,用时稀释十倍。
  • 游客
举报 2018-02-05 03:47
你没写要多少PH值的