荧光抗体技术荧光素操作过程为何要避光..._抗荧光素_二抗_抗体类_知道

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游客	收藏 \| 举报 2018-01-14 12:35 关注：163 回答：1 荧光抗体技术荧光素操作过程为何要避光... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-05-20 05:05 荧光抗体技术荧光素操作过程为何要避光

游客

举报 2018-01-17 16:02

（1）生物化学反应需要酶的催化作用，所以荧光素在荧光素酶和ATP等物质的参与下可进行反应发出荧光．ATP是生命活动能量的直接来源，发光强度与ATP的含量成正比，所以根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量．
（2）影响酶活性的外界因素有温度和pH，其中维持溶液pH的相对稳定时常常使用缓冲液．分光光度计反应室内发生的能量转换是ATP中活跃的化学能转化为光能．
（3）根据题意和图示分析可知：图中e、f、g点所对应的荧光素酶浓度不同，但发光强度相同，表明达到e点所对应的荧光素酶浓度时，ATP已经全部水解，即使继续增加酶浓度，由于受ATP数量限制，发光强度也不再增加，因此e点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度．
（4）每个细菌细胞中ATP的含量大致相同且相对稳定，可以根据样品中细菌的ATP总含量，测算出细菌的数量．