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【讨论】关于 全病毒的单克隆抗体... 已解决
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【讨论】关于 全病毒的单克隆抗体
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2011-03-27 11:32
全病毒怎么做单克隆呢？全病毒基因组虽然碱基不长，但还是包括若干个编码蛋白，这些蛋白通常具有免疫原性，没办法做单克隆抗体。
你的问题可能需要说详细点，这样才能给你建议。 |
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2011-03-26 07:01
你好！
我是拿全病毒打，然后用全病毒进行ELISA筛选的，不管是针对哪个表位，只要是单个克隆就行。如果筛到的是某段蛋白的某个抗原表位，那如果用全病毒进行SDS-PAGE电泳再进行Western-blot，你觉得可以跑出这段蛋白吗？ |
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2011-03-18 04:24
很难说一定能跑出蛋白条带。
因为你用全病毒来进行SDS-PAGE，必须将病毒蛋白变性（100度煮沸），这样蛋白的结构就发生了变异。 而你用的抗体可能需要与相应的蛋白进行空间构想识别的话，那么就不能跑出来了。 而且，你要知道你用全病毒，杂蛋白比较多，可能结果特异性不高，干扰你的判断。 |
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2011-03-17 08:09
你好！
那怎么才能知道我所筛的抗体是针对病毒的呢？因为我目前就是用全病毒（精制）包被板来进行ELISA筛选的，杂交瘤细胞冻了一段时间再复苏出来，ELISA检测还是阳性的，就是Western跑不出来。现在就是有两种可能，一种是抗体如你所说，针对构象表位的，一种是非特异的，那我要怎么进一步鉴别呢？ 谢谢！ |
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2011-03-26 14:09
我个人认为所谓的全病毒单抗就是表位信息不清楚的单克隆抗体。。
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2011-03-24 12:57
不知道你的全病毒（精制）具体是如何做出来的，但是通常来讲，会含有一些杂质，可能影响你的Elisa结果。而且，仅有一个试验结果，无法来证明你制备出了全病毒的单克隆抗体。
至于WB跑不出来，个人认为有极大的可能性是你的单克隆抗体失败。我上面说的情况，可能存在，但可能性非常小。 |
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