• 游客
收藏 | 举报 2007-07-19 17:25   关注:224   回答:3

【分享】环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Is...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-05-04 21:10
【分享】环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification, LAMP)专题讨论

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  • 游客
举报 2007-07-23 16:41
mylab,您好!我最近用官方软件设计了一套引物做LAMP,跑出了梯形条带,但是LAMP的最小条带比用外引物跑出来的条带要小这是什么原因啊?望指教!!!
  • 游客
举报 2007-07-30 21:56
我还想问一下,LAMP的最小条带到底是从哪到哪啊,很困惑。还有如何分析条带是否是目的条带还是非特异性扩增,还是只要能跑出梯形条带就能证明试验成功了呢?
急需帮助
  • 游客
举报 2007-07-31 02:42
zhysh1231

LAMP的大多数产物,是FIP和BIP扩增出来的,最小条带应该比用外引物跑出来的条带要小。如果用了环状引物,应该更加明显一些。但差别应该不明显,如果您的最小条带是<100bp,应该是引物多聚体。

如何分析条带是否是目的条带还是非特异性扩增。LAMP的扩增,是4或6对引物针对靶序列的6或8个区域,特异性是非常的好。一般只要能跑出梯形条带就能证明试验成功了。如果不放心,可在F1和B1之间选择一个内切酶酶切,能够得到特定大小条带;更保险的办法就是做个Southern杂交了。

建议再好好学习一下第一篇LAMP的文章,见NAR, 2000, 28(12):e63。