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| 货号： | WLC0002 |
| 规格： | T25/冻存 |
基本信息：该产品为人乳腺癌细胞， 上皮样贴壁生长，90%高糖DMEM+10%FBS+1%双抗，37℃，5%CO2培养箱中培养，湿度保持在70%-80%，可按1:3-1:6比例进行传代，冻存条件为90%FBS+ 210%DMSO于液氮中保存。本品具有潜在的生物安全性，必须在二级生物安全台内操作，并做好防护措施，所有废液及器具需灭菌后方能丢弃。本产品支原体检测结果为阴性。
包装信息：
| 细胞名称 | MCF-7（人乳腺癌细胞） |
| 货 号 | WLC0002 |
| 规 格 | T25培养瓶（密度80%-90%）或2ml冻存管（1ml细胞悬液） |
注意事项：
1. 收到细胞后，若为培养瓶，请对细胞培养瓶外表面进行消毒，建议在培养箱稳定4小时左右再依据细胞密度进行换液或传代。
2. 若为冻存管，请将冻存管放于液氮中，过夜后进行复苏培养，或直接复苏。
3. 收到细胞后请尽快更换为新鲜的完全培养基，不建议使用原瓶中培养基。
细胞传代：
1.严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出原培养瓶中的培养基（严禁直接倾倒）,PBS缓冲液润洗细胞两次，T25瓶中加1-2ml 0.25% EDTA的胰酶室温或37℃进行消化（注意摇动培养瓶使胰酶均匀铺满瓶底，并严格把握消化时间）。
2.镜下观察消化情况，当细胞边缘缩小，细胞变圆时去掉胰酶（若消化到细胞漂浮可能会影响细胞活力），加6-8ml 完全培养基，轻轻吹打细胞，尽量把细胞吹落、吹散。
3.收集细胞至无菌离心管中，800-1000rpm离心3-5min，弃上清，重新加入新鲜培养基混匀细胞，转移至2个（1:2）或3个（1:3）培养皿/瓶中，放于培养箱中培养完成传代。也可不经离心，直接取出部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基于培养箱中培养。
注意培养基PH值变化，定期换液，待细胞密度约80%或以上时重复传代操作或冻存。
常见问题：
1. 培养瓶有破裂，导致漏液：可能会引起细胞的污染，建议随时观察状态并及时反馈。
2. 贴壁细胞细胞漂浮：收到细胞时细胞漂浮或部分漂浮，若放置4小时后大部分细胞又贴壁，表明细胞活力正常，可将漂浮细胞去掉，留过滤后的原培养基或新配制的完全培养基继续培养，待细胞密度约80%以上，进行传代等操作。若放置4小时后细胞仍不贴壁，请将漂浮细胞及胰酶消化后的贴壁细胞收集至离心管中，800-1000rpm离心3-5min，弃上清，重新加入过滤后的原培养基或新鲜培养基继续培养。
3.贴壁细胞生长缓慢：适当提高血清浓度（建议不超过20%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养皿/瓶继续培养。
4. 生长不均：贴壁细胞若出现生长不均，成岛状生长，可将细胞消化离心，重新吹散细胞，加入新鲜培养基继续培养。
[VIP第1年] 指数:3
通过沈阳市浑南区市场监督管理局认证 
