细胞转染

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更新: 2021-05-26
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提供商: 上海鸿立生物技术有限公司
服务名称: 细胞转染
上海鸿立生物技术有限公司拥有稳固的技术平台,高效的服务团队。以技术服务为核心为广大客户提供真实可靠的实验数据,细致入微的服务。可为客户提供细胞转染(质粒),Western Blot,免疫共沉淀Real time PCR, Elisa,免疫荧光,激光共聚焦,病毒包装,CCK8, Transwell 等单项实验服务,并有能力承接肿瘤,神经等方面的实验课题,帮助客户完成实验构思,操作及英文文章润笔等专项服务
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 转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。
细胞化学转染

  细胞化学转染

 
  常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内(依赖于各种不同的构建)分析结果,常常用到一些报告系统如荧光蛋白,β半乳糖苷酶等来帮助检测。后者也称稳定转染,外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体(episome)存在。尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小,大约1/104转染细胞能整合,通常需要通过一些选择性标记,如来氨丙基转移酶(APH;新霉素抗性基因),潮霉素B磷酸转移酶(HPH),胸苷激酶(TK)等反复筛选,得到稳定转染的同源细胞系。
 
  转染技术的选择对转染结果影响也很大,许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例,细胞数量,培养及检测时间等。