载体构建

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更新: 2021-05-30
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提供商: 北京亿鸣复兴生物科技有限公司
服务名称: 载体构建

  载体构建(vectorconstruction)是把连接好的DNA分子运送到受体细胞中去。首先,必须寻找一种能进入细胞、在装载了外来的DNA片段后仍能照样复制的运载体。理想的运载体是质粒(plasmid),在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。当给质粒插入一段外源DNA片段后,它依然能够进行自我复制。 载体构建是分子生物学研究常用的手段之一。
我们在载体构建上有丰富的经验,提供各种载体构建服务,包括常规的蛋白表达载体(大肠杆菌、酵母、昆虫、哺乳动物)的构建,报告基因载体,启动子、增强子等功能基因验证载体,miRNA、siRNA、shRNA功能验证载体、腺病毒包装载体、慢病毒包装载体等载体构建是分子生物学研究中最常用到的手段之一。但由于影响因素较多,对研究者经验要求较高,因而往往费时费力。我公司凭借长期分子生物学工作的丰富经验,集中人力,为您提供高效、快捷的服务。可根据已有载体进行改造方案的设计,完成现有载体不同功能元件的改造,也可以应客户要求将指定片段亚克隆至各载体。
★服务内容:
1) 为客户构建或改造特定的载体,将目的基因装载到特定的载体上。
2) 已有载体多克隆位点(MCS)的改造;启动子、增强子、筛选标志物等功能元件的改造。

★您需要提供的信息
1) 克隆要求及相关的实验材料,图谱,以及构建方案。克隆完成后如需测序并且要求序列完全匹配,则需提供全序列。
2) 载体改造的具体要求,预进行改造的质粒(序列经测序验证正确)及其图谱和序列,能够获得所需元件或基因的模板(质粒或其它)及其相关图谱和序列。
3) 对于载体改造和基因片段克隆,客户需要提供载体、PCR产物或酶切产物、以及载体来源及基因背景资料等。
4) 对于表达载体、报道基因载体与病毒载体的构建,您需要提供含有目的基因的质粒或cDNA克隆模板、序列资料、目标蛋白的基因序列与酶切位点、以及载体等资料。
5) 若客户只提供组织或细胞样本,请提供所需克隆基因的NCBI登录号或电子版全序列。
6) 客户自带的载体需提供详细的酶切图谱及相关信息。


★服务周期
 服务项目 实验周期
普通载体构建 2周起,看具体改变的基因元件数量
基因表达载体构建(<500bp) 2周起,看具体改变的基因元件数量
基因表达载体构建(500bp-2000bp) 2周起,看具体改变的基因元件数量
基因表达载体构建(>2000bp) 2周起,看具体改变的基因元件数量
★服务承诺
    我们提供给您详细的实验报告(包括实验方法、照片图片等)、测序结果(测序彩色波形图、测序方向图、序列碱基图)、酶切位点图、电泳图谱,测序图谱,酶切图、构建好的重组质粒及含该质粒的穿刺菌保等。


★客户须知
1) 若客户提供组织或细胞样本,我们公司将额外收取RNA提取及逆转录的费用。
2) 我们公司可以免费提供常见的克隆载体,如pMD18等。

三. RACE技术:

★服务内容:
根据客户提供的一段非全长的cDNA序列,我们可以通过RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 技术进一步扩增此cDNA的5'末端或3'末端,从而得到全长的cDNA。获得cDNA的完整序列。这对下游的基因结构、蛋白表达、基因功能研究至关重要。RACE法是通过PCR技术来实现的,无须建立cDNA文库,可以在很短的时间内获得有价值的信息。可以为您节省宝贵的时间。

★您需要提供的信息:
(1) 您可以选择提供样品组织材料,或是材料的总RNA:但必须保证您提供的实验材料新鲜,请您采样后立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂;您提供的总RNA必须无降解,无基因组DNA污染,OD260/OD280在1.8-2.0之间。
(2)3' RACE实验要求总RNA量大于10 mg,5' RACE实验要求总RNA量大于15 mg。如果基因的丰度较低或者未知序列较长,根据具体实验的情况增加实验材料的量。
(3) 已知的参考序列长度≥150 bp。我们将对已知序列进行验证,如果验证结果与您提供的序列完全不符,我们将停止实验并收取实验成本费用。如果验证结果与您提供的序列有个别碱基不符,我们在征求您的意见后决定是否进行RACE实验。



★服务周期: 4-5周(20-25个工作日)

★服务承诺:
我们提供给您构建好的5’和3’RACE TA克隆(含有5’断和3’断目的序列的菌液和质粒);测序图谱;序列比对结果,载体详细信息及其完整的实验报告。

★客户须知:
客户必须保证所提供的文献材料的准确性,如果是因客户自己的原因造成实验的 失败,后果由客户承担。

有需要实验的老师请联系 印磊
手    机:17610828357
Q     Q:497335684
座    机:010-62895234
邮    箱:quling@esyan.cn
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