Realtime PCR (定量PCR)技术服务

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更新: 2021-05-15
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提供商: GENELIFE
服务名称: Realtime PCR 技术服务

  

实时荧光定量PCR 技术的应用

1、DNA 或RNA 的绝对定量分析:包括病原微生物或病毒含量的检测,转基因动植物转基因拷贝数的检测,RNAi 基因失活率的检测等
2、基因表达差异分析:例如比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等 ),特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA 芯片或差显结果的确证。
3、基因分型:例如SNP 检测,甲基化检测等。

实验平台及实验方法

        GENELIFE 技术服务平台目前使用的仪器为美国Applied Biosystems公司最新推出的ABI7900HT型高通量实时荧光定量PCR系统。由于其在定量PCR系统领域的领先地位,优越的配置,精准的实验数据,加上快速高通量的强大功能,使得该系统已经成为各大医院,科研机构的首选。
       提供的Realtime-PCR实验服务包括 TaqMan荧光探针法和SYBR Green荧光染料法。为了保证实验数据的可靠性和壳重复性,所用试剂均为ABI原装试剂盒。

    

委托服务流程

1、签订服务合同:由公司专业的客户服务人员与您就具体的实验情况进行沟通,确定实验方案并签订委托服务协议。
2、设计引物:根据客户提供的目的基因及物种信息,设计、合成特异的引物和探针。并根据客户的具体研究情况选择适宜的内参基因。
3、样品处理: A、客户提供组织、细胞,公司提取RNA并进行RNA的电泳检测
                       B、客户提供RNA,公司直接进行电泳检测
                       C、客户提供cDNA,公司进行内参基因的PCR检测
4、Realtime-PCR实验:A、RNA进行逆转成cDNA
                                        B、利用合成的引物进行普通PCR预实验,选择只有扩增出一条特异条带的引物进行定量PCR
                                        C、构建标准品,建立标准曲线
                                        D、利用ABI公司提供的进口原装试剂盒在ABI7900HT仪器上进行Realtime-PCR 实验
5、出具实验报告:包括样品质检报告、实验数据分析、实验方法及样品的PCR扩增曲线,溶解曲线和标准曲线。