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货号：	K06020A
供应商：	弘业新创抗体技术股份有限公司
数量：	大量
保质期：	12个月
保存条件：	-20℃
规格：	20μl

克隆用T载体试剂盒

克隆用T载体试剂盒产品说明

pBAT-1载体是高效克隆T载体，线性化载体3’-末端含有突出的碱基“T”，可以将3’-末端含有“A”的PCR扩增产物高效率的连接至pBAT-1载体上。本试剂盒中含有的高效连接液Ligation Mixture可以方便的将载体和外源片段进行高效连接，反应产物可以直接用于转化。

产品特色

一步法完成基因克隆与表达载体的构建，所得到的阳性质粒载体可以直接用于表达。节约时间、节约成本。

克隆用T载体试剂盒成分

pBAT-7 （70 ng/μl） 20 μl 1支
Ligation Mixture 150 μl 1支
Plbu 150 μl 1支
PNETR 150 μl 1支

克隆用T载体试剂盒保存条件

保存温度：-20 ℃
有效期：12个月

使用方法

1、在微量离心管中配制以下DNA溶液，全量为5μl。

pBAT-1	1 μl（70 ng）
PCR片段	适量
水	补足至5 µl

2、加入5μl的Ligation Mixture。
3、4℃反应过夜或者16 ℃连接2小时至4小时。将10 μl连接混合液加入100 μl感受态细胞中，冰水浴放置30分钟。
4、迅速置于42 ℃水浴热激2分钟，迅速在冰水浴放置2分钟。
5、加入900 μl 2YT（或LB）培养基，37 ℃，180 rpm振荡培养45分钟。高速离心收集菌体，去掉800 μl上清，留200 μl重悬细胞。
6、将200 μl细胞重悬液涂布在含有相应抗生素的琼脂平板培养基上，37 ℃倒置培养过夜，形成单克隆。挑取单菌落，鉴定阳性克隆。

注意事项

1、Ligation Mixture溶液请于冰水浴中溶解，混匀后再使用。
2、连接反应请在16℃以下进行，温度升高较难形成环状DNA。连接时间控制在4℃反应过夜或者16℃反应2小时至4小时。对于较难连接的反应，可以4 ℃过夜和16 ℃连接2小时交替连接。反应时间过短或者温度高较难筛选得到阳性克隆。
3、为提高克隆鉴定的效率，本试剂盒提供了载体上游引物和载体下游引物，以便于用菌落PCR鉴定阳性插入克隆时使用。也可用作测序引物。

产品目录及报价

货号	产品名称	规格	报价(元)
K06020A	克隆用T载体试剂盒	20μl	400
K06020V	克隆用T载体	20μl	270

必拓生物（Bio-tool）品牌介绍
必拓生物(Bio-tool)是 弘业新创抗体技术股份有限公司的生物试剂品牌。必拓生物(Bio-tool)紧密结合市场需求，专注于细胞培养与冻存、抗体检测与蛋白纯化、以及各类分子生物学试剂的研发与生产，目前已有近千种优质产品，应用于科研实验、体外诊断/检测试剂盒开发以及药物开发等领域，且产品品质获得广大用户的一致好评。

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温馨提示：不可用于临床治疗。

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