流式细胞检测及分选_细胞生物学探针_生物分子_生化试剂库_商城

提供商：	汉藤
服务名称：	流式细胞检测及分选技术服务
规格：	管

汉藤生物流式细胞检测技术服务（FCMS）

服务介绍

流式细胞术（flow cytometry，FCM）是单克隆抗体、免疫细胞化学技术、荧光标记、激光技术和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物。工作原理是使悬浮在液体中的分散的荧光标记的细胞或微粒逐个通过样品池，被激光器发出的激光激发荧光物质发射出荧光。由荧光探测器捕获该荧光信号，这些荧光信号再经过光电转换器（光电二极管和光电倍增管）转换成电信号，经计算机处理后形成相应的图像后进行数据分析。
流式细胞术可以对细胞（表面或内部物质）或亚细胞结构（胞内DNA、mRNA、miRNA、蛋白质、钙离子、活性氧、染色体等）或相关微粒（微球、细菌、真菌等）进行快速定性分析、定量分析和选择性分离。
其特点：

测量速度快，最快可在1秒内计测数万个细胞；
可进行多参数测量（最多30种），可以对同一个细胞或微粒做有关物理、化学特性的近100种参数测定，并具有明显的统计学意义；
既可研究蛋白质（表面蛋白质、胞内蛋白质），又可以研究基因（DNA、mRNA、microRNA）；
既是分析技术，又是精确的分选技术（细胞或者染色体）

流式细胞分析的样本一般要求是单细胞悬液，可以是血液（抗凝全血、血清、血浆），悬浮细胞培养液，各种体液、新鲜实体瘤的单细胞悬液，人造微粒（微球）以及石蜡包埋组织的单细胞悬液等。
服务流程

服务特点
     1、我公司拥有哈佛及中科院流式研究及应用专家多名，全方位科研指导、规范的操作流程、完善的设备管理（国外最先进的流式检测及分选设备），服务周期短；并配有健全的样品配送体系，可接收异地标本（标本36小时内接收可处理）。
     2、服务项目丰富，可进行基因研究、蛋白质研究、细胞研究等多种不同生物学分析。
服务价格
  对于一些比较基础的流式实验，如计数，增殖，周期，凋亡等，单管价格最高80元（不含抗体),10管起做（不足10管算10管收费），量多有梯度优惠，欢迎垂询；如果涉及一些个性化流式检测，我们会根据客户事宜按所有试剂品牌、样本量、实验复杂程度、样本处理复杂程度、客户结果要求难易程度、合同大小、结账周期等因素考虑报价，所以具体信息请与公司联系，在确定必要信息后再报价。
服务内容及结果
〖内容〗

项目	细胞研究	蛋白质研究	基因研究
1	细胞分选	胞内因子检测	DNA倍体分析
2	细胞绝对计数	胞外因子检测	基因表达分析
3	免疫细胞表型分析	膜蛋白表达检测	RNA分析
4	细胞增殖	磷酸化蛋白质检测	染色体分选
5	细胞凋亡	钙离子检测	癌基因分选
6	免疫功能评价	癌基因蛋白质检测	微生物研究
7	免疫毒理评价	耐药蛋白质检测	生殖毒理评价
8	细胞标志定量分析	凋亡蛋白质检测	耐药基因研究
9	线粒体膜电位分析	转录因子检测	精子分选
10	干细胞分化研究	GFP重组蛋白表达检测	miRNA分析
11	血小板功能研究
12	肿瘤细胞研究

〖结果〗

实验步骤（试剂品牌、仪器、操作过程）
实验原始数据
实验图表（常规方式或者合同约定方式）
实验简单结论

〖结果示例〗

说明：人外周血淋巴细胞分离提纯后，在anti-CD3/28抗体佛波酯PMA刺激5小时后白细胞介素2（IL-2），肿瘤坏死因子-TNF及干扰素-IFN的细胞内染色情况。

说明：人外周血淋巴细胞受anti-CD3/28抗体刺激，并在加有IL-2及胎牛血清的RPMI完全培养基中培养4天后的细胞增殖情况。CFSE细胞染料在子代细胞群中的的逐渐稀释明确地指示了细胞的增殖情况。7-AAD显示了细胞在增殖过程中的活性变化。
客户需提供信息
如客户实验方案已拟定且自己提供抗体，经双方商议无误后，可提供以下信息（附建议）：

标本：组织、细胞、全血（抗凝）
抗体：（荧光素标记）

PE最强，适用于弱表达抗原
FITC最便宜，适用于强表达抗原，适用范围广
Biotin-avidin 不适合弱抗原的检测

其他试剂(如Fluo-3)
染色试剂盒

如客户有流式检测需求，但方案未定或试剂耗材尚未采购，我公司可提供一站式服务，具体内容可商榷。
客户须知

取样：请实验前与我们联系，确定好样品信息、实验条件及要求，如抗凝方式、全血、血清、血浆等；是否离心；是否分离单核细胞等；
保存：不同的实验针对样品保存温度、保存时间的要求都不同，请提前与我们联系，确认运输条件。
数据处理：建议客户在设计实验方案的时候与技术人员确定最终的数据处理及报告方式，最好有相应的文献支持，这样方便您最终发表自己的实验结果，不同的期刊对数据的表达方式要求也不同，特别提醒客户注意；
我公司代理各种试验用抗体，价格公道，质量有保证且供货周期短。如果客户样品较多，可为您节约时间、降低采购风险；如果客户的样品不多，可为您节约研究经费，避免购买过多抗体。
如果客户自己提供抗体，请按合同的要求提供，同时注意抗体的保存条件并提前通知我方接收，以便确定实验开展的时间；如违规操作，我公司不保证实验结果的可靠性。

常见问题汇总：
1.所用试剂品牌问题？ 答：一般情况下公司会根据客户的预算和要求选择相应的试剂，但由于流式检测对试剂及操作的经验要求较高，另客户可能会投一些外文主流期刊，为慎重起见建议客户选择已验证效果比较好的进口试剂，一方面以减少实验失败的风险，另一方面结果较容易被认可。现主要品牌有BD Pharmging、eBioscience、Biolegend、Beckman。
   2.你们公司有没有比较成熟的流式实验方案？ 答：T/B/NK细胞的分析与分选、细胞凋亡、DNA倍性、干细胞分析与分型、胞外因子检测、胞内因子检测、免疫药理/毒理评价、血小板研究等
   3.你们所用的实验仪器是什么品牌，哪种型号？ 答：公司目前所用的流式检测及分选仪器均为BD品牌，如Calibure、AriaII、Canto II Plus、C6等，可做四色、六色、八色、十色、十三色分析，分选设备含3根激光，可根据实验需求自由选择。
   4.一般实验过程是怎么样的？ 答：确定实验目的     选择流式实验方案     分析样本处理     确认所用仪器（主要是激光器波长及检测器波长）    查找所用标记（配色）     查找相应抗体及同型对照     再次确认实验方案     确认报价及成交价格    预实验验证结果     正式实验     分析结果      实验结束（返还剩余标本及试剂）
5.常用激光器及荧光素？ 答：比较常用的激光器一般是488nm和633nm两根，常见荧光素是FITC/PerCP/PE-CY5/APC/APC-CY7这六种荧光标记的抗体，具体用时主要还要看仪器和抗体标记情况（有没有相应的标记抗体往往成为限制实验的瓶颈）。
6.同型对照的目的？ 答：流式同型对照的目的主要是为了减少非特异性结合，确认是相应的抗原决定簇与抗体之间的反应，保证结果特异性的真是有效性，但是这仅仅是一种方式，还有别的方法减少非特异性结合。

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