DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针

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单价: 488.00
品牌: Yeasen
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更新: 2020-10-24
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货号: 40725ES10
供应商: Yeasen
数量: 大量
英文名: DiO (DiOC18(3))
保存条件: -20 ºC
规格: 10mg
DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针
产品信息
产品名称 产品编号 规格 储存 价格(元)
DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针 40725ES10 10mg -20 ºC 488.00
DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针 40725ES25 25mg -20 ºC 988.00
产品描述
DiO是一种亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。进入细胞膜后,DiO在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出绿色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。可以用标准的FITC滤光片检测。
DiO通常不会明显影响细胞的生存力,因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
产品性质
同义名(Synonym DiOC18(3); DiO perchlorate; 3,3-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate
CAS 号(CAS NO. 34215-57-1
分子式(Molecular Fomular C53H85ClN2O6
分子量(Molecular Weight 881.72
外观(Appearance 橘色至红色固体
Ex/Em 484/501 nm
推荐滤光器(Filter XF23-Omega, 31001-Chroma
纯度(Purity >97%
溶解性(Solubility 溶于DMF,DMSO,乙醇
结构式(Structure
运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。产品-20 ºC干燥避光保存,有效期1年。
注意事项
1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2)染色固定的细胞或组织时,通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛固定,使用其它不适当固定液会导致荧光背景较高。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法
1. 染色液制备
1)配置DMSOEtOH 储存液:储存液用DMSO或EtOH配置浓度1~2 mM。
注】:a、未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,可稳定保存6个月。
b、发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。
2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 μM的工作液。
注】:工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。
2. 悬浮细胞染色
(1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。
(2)37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
(3)孵育结束,按1000~1500 rpm离心5min。
(4)倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
(5)重复(3),(4)步骤两次以上。
3. 贴壁细胞的染色
(1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)37℃孵育细胞 2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸干培养基。
4. 显微镜检测
(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
(2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:
a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005
1 相关产品性质
产品名称 货号 分子量 Ex/Em 推荐滤光器
DiO 40725ES10 881.7 484/501 nm XF23-Omega, 31001-Chroma
DiI 40726ES10 933.87 550/567 nm XF32-Omega, 31002-Chroma
DiD 40758ES25 959.91 644/663 nm XF47-Omega, 31023-Chroma
DiR 40757ES25 1013.39 748/780 nm XF112-Omega,41009-Chroma
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温馨提示:不可用于临床治疗。