TRF技术(时间分辨荧光技术)

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品牌: 珀金埃尔默(PerkinElmer)
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更新: 2020-11-07
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TRF技术利用了镧系元素螯合物所发出的荧光衰减时间很长的特点,其灵敏度高,动态范围广。下表列出了镧系元素铕的螯合物和常用的荧光素之间的比较。

 

铕螯合物(Eu-chelate)

荧光素

激发光峰值(nm)

340

490

发射光峰值(nm)

613

515

Strokes’ shift (nm)

273

25

衰减时间(ns)

730000

3

发射光波长宽度

背景干扰

自淬灭

重复测量次数

多标记应用

有限

从上表中可以看出TRF技术的几大特点:

l        

镧系元素的宽Stroke’ s shift

镧系螯合物激发后的衰减曲线

普通荧光激发后的衰减曲线

检测的时间窗口

镧系元素的超长衰减时间

很大的Strokes shift,减少了激发光和发射光的干扰,降低了自淬灭,提高了灵敏度。

 

l         发射光持续时间长,最高可达传统荧光素的数万倍,从而可以延迟检测,扣除背景荧光。

l         高灵敏度,因为扣除了背景荧光,所以可以得到比常规荧光高得多的灵敏度。

l         多重标记,镧系元素中的铕,铽,镝和钐的发射光波长差异明显,最大可以进行四重标记。

根据时间分辨荧光的原理衍生出的相关技术,包括DELFIA、LANCE和TruPoint等。