WIP组织细胞裂解液

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单价: 1200.00
品牌: eBioscience
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更新: 2019-06-11
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货号: XY-0013
供应商: 上海信裕
数量: 大量
英文名: WIP(Tissue and Cellkit
保质期: 6个月

WIP组织细胞裂解液产品标准:国际通用标准

产品应用:用于组织细胞裂解

产品介绍:

         一.WIP组织细胞裂解液使用说明书        二.使用方法说明
         一. WIP组织细胞裂解液使用说明书
    产品简介
    WIP组织细胞裂解液(Tissue and Cell lysis solution for Western Blot and Immunoprecipitation ),是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。本产品裂解细胞获得的裂解产物,可用于PAGE,蛋白印迹(Western Blot),免疫沉淀(immnolprecipitation,IP),免疫共沉淀(co-IP) 和蛋白与多肽的分离纯化。
    WIP裂解液的主要成分为Tris(pH 7.5,20mM),150mM NaCl,去垢剂Triton X-100以及多种蛋白酶抑制剂,无需自备PMSF、磷酸酶抑制剂等蛋白酶抑制剂。WIP不仅可以用于细胞培养物的裂解,也可直接用于大多数动物组织的裂解。在有效地裂解组织和细胞的同时,可强烈地抑制蛋白、多肽的降解,并保持原有的分子结构和蛋白间相互作用。
    用WIP裂解得到的组织细胞蛋白样品,可以用博奥森生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质,不能用Bradford试剂盒测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
        包装清单
        WIP组织细胞裂解液        30ml
        PMSF(100X)             0.3ml
        保存条件:
        -20℃保存,一年有效。 
       
WIP组织细胞裂解液 注意事项:
        1.为获得最佳的实验效果,可适当分装使用,以尽量避免反复冻融。
        2.PMSF应现用现加。
        3.裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
        4.蛋白酶抑制剂均有较高的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。一旦直接接触,请立即用流水冲洗,再向医疗保健结构咨询。

        二.使用方法说明
    1.培养细胞
    取出WIP裂解液,待融化后,颠倒混匀数次,适量分装冻存。在使用前取出,按比例加入PMSF(使其最终浓度为1mM),混匀,立即使用。
    贴壁细胞,去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗2-3遍(如血清中的蛋白没有干扰,也可以不洗)。按6孔板每孔加入100-200微升的比例加入WIP。用枪吹打数下,使WIP和细胞充分接触。通常WIP接触细胞数秒后细胞就会被裂解。
    悬浮细胞,收集培养细胞,离心去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗2-3遍(如血清中的蛋白没有干扰,也可以不洗),用手指把细胞用力弹散,按6孔板每孔细胞加入100-200微升的比例加入WIP。如果细胞数量较大,应按50-100万细胞/管分装或根据细胞数量按比例增加WIP。用手指轻弹管底以促进WIP和细胞充分接触,裂解完全时应无明显的细胞颗粒。
    裂解物经10,000-14,000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
    裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入100微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150微升或200微升。
    2.组织样品
    取Ep管,分别称重标记,把组织剪切成小块装入Ep管中,称重。按每20毫克组织加100-200微升的比例加入WIP(如裂解不完全,可以适当增加WIP的用量;如需要的蛋白样品浓度较高,可以适当减少WIP的用量)。用手握式电动组织细胞匀浆器匀浆约1分钟或直至充分裂解。10,000-14,000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
    如果组织样品本身非常细小,如淋巴细胞,可直接加入WIP裂解,通过振荡(Vortex)以使样品裂解完全

xyH122Hu    【中文名称】:人前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Six Transmembrane Epithelial Antigen Of The Prostate 2 (STEAP2)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyJ244Hu    【中文名称】:人DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for DNA Methyltransferase 1 (DNMT1)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyC429Hu    【中文名称】:人死亡关联蛋白激酶1(DAPK1)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Death Associated Protein Kinase 1 (DAPK1)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyE072Hu    【中文名称】:人原钙黏素β16(PCDHβ16)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Protocadherin Beta 16 (PCDHb16)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyC984Hu    【中文名称】:人多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Poly ADP Ribose Polymerase 4 (PARP4)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyH777Hu    【中文名称】:人中间α-球蛋白抑制因子H3(ITIH3)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H3 (ITIH3)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyJ337Hu    【中文名称】:人软骨关联蛋白(CRTAP)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Cartilage Associated Protein (CRTAP)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyF862Hu    【中文名称】:人扭转原肠胚形成同源物1(TWSG1)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Twisted Gastrulation Protein Homolog 1 (TWSG1)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyC241Hu    【中文名称】:人端粒酶逆转录酶(TERT)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Telomerase Reverse Transcriptase (TERT)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyJ548Hu    【中文名称】:人BMP结合内皮调节因子(BMPER)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for BMP Binding Endothelial Regulator (BMPER)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyC359Hu    【中文名称】:人钙磷蛋白(CAPS)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Calcyphosine (CAPS)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyC445Hu    【中文名称】:人奇异不良素(DYSF)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Dysferlin (DYSF)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyE867Hu    【中文名称】:人补体成分1q子成分样蛋白1(C1qL1)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Complement Component 1, Q Subcomponent Like Protein 1 (C1qL1)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyE869Hu    【中文名称】:人补体成分1q子成分C(C1qC)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Complement Component 1, Q Subcomponent C (C1qC)     【灵敏度】:9.375pg/mL
xyF913Hu    【中文名称】:人斯钙素2(STC2)ELISA试剂盒    【英文名称】:ELISA Kit for Stanniocalcin 2 (STC2)     【灵敏度】:9.375pg/mL
WIP组织细胞裂解液

 
温馨提示:不可用于临床治疗。