植物病原体检测试剂盒--prime diagnostics

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更新: 2021-05-25
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  Prime Diagnostics提供多达150种植物病原体的检测产品,如病毒、细菌、真菌和类病毒。

用户可根据自身需求,来选择植物病原菌检测试剂盒的类型——选择现场检测或实验室检测;简单检测单一病原体还是同时检测多种病原体。

Prime Diagnostics提供有效的植物疾病诊断解决方案,其拥有自己的现代化实验室和抗体研发机构,与农业部门和知名研究机构紧密合作,始终紧扣市场需求,所有产品质量可靠,性能卓越。

 

产品类型

1.       单一病原体的实验室检测产品

病毒性病原菌检测,采用的是DAS-ELISA方法。

细菌性病原菌检测,多采用的是IIF(间接法免疫荧光),部分采用IFDSA-ELISA

 

 

2.       多种病原体的实验室检测产品

Prime Diagnostics有两种多重检测产品线,第一个为Luminex xMAP,基于蛋白的检测系统。第二个为基于DNARNA的检测系统。

(1)   LuminexxMAP®多重检测

Luminex Xmap——基于颜色编码顺磁微球的多重检测系统

特异的抗体与这些顺磁微球结合,病毒或是细菌等植物病原体与之结合。激光分析器检测与病原体结合的荧光标记二抗。这一技术能同时有效检测多达百种病原体。

使用Flexmap 3D analyzerLuminexxMAP®可同时分析多达500个参数。通过组合不同的特异抗原,Prime Diagnostics提供多种不同的组合方式用于多重分析,Prime DiagnosticsLuminexx MAP®试剂盒卓越性能已经检测证实。

样品中的病原体在微球表面实现检测:微球添加入96孔板的样品中,每一种微球特异性结合其特异的靶标分子(抗体),加入二抗,经结合标记,分析仪上检测,分析仪通过分析样品内部染料确定微球。

该多重检测技术省时省力。

原理

xMAP技术基于聚***乙烯微球或是柱子。其根据颜色的编码特异辨认每种微球。

结合一个病原体的抗体与特异柱子结合,生成特异的抗体结合柱。

这些特异组合组在一起,在单一样中检测一组不同的病原体。

连接抗体结合病原体,没有相应病原体的话,则没有东西结合上来。

加入荧光探针连接的二抗,由柱子、病原体和抗体形成的三明治,经分析仪分析获取。

(2)    LuminexMagPlex-TAG®多重检测系统

为了检测植物真菌、细菌、病毒和类病毒的DNARNAPrime Diagnostics选择了基于靶标特异性引物延伸(Target Specific Primer Extension, TSPE)方法。TSPEPCRLuminex MagPlex-TAG®的多重检测能力结合,旨在在免疫检测不适合或应用受限的情况下检测病原体DNA/RNA

TSPE方法由如下步骤:

1) 样品材料的DNA提取

2) 使用靶标特异的引物系列经PCR扩增基因组DNARNA

3) 通过TSPE反应进行PCR产物纯化,在此过程中生物素标记的dCTPs (biotinylated dCTPs)掺入新聚合的DNA链中。每一个TSPE引物携带有特异的MagPlex-TAG®,这种标签可与结合在特定Luminex柱子上的抗标签(anti-tag)特异性结合。

4) TSPE 产物通过与抗标签特异性退火而结合在微球上。

The TSPE products are uniquely annealed to the microspheres through the specificity of the MagPlex-TAG®/ ‘anti-tag’ recognition.

5) 之后,生物素标记的dCTPs由链亲和素(streptavidin)连接的荧光报告染料标记。在检测时,Luminex通过微球末端的染料确定每一微球,记录链亲和素相关报告染料的强度。通过特异的TSPE产物同时确定多种不同柱子,从而使Luminex MagPlex-TAG®s系统成为真正的多重检测平台。

其流程如下:

产品:

Fusarium 镰刀菌  Luminex MagPlex-TAG® kit

Phytophthora  疫霉属  Luminex MagPlex-TAG® kit

Viroids and Viruses  类病毒和病毒  Luminex MagPlex-TAG® kit

 

1.       单一或多种病原体的现场检测产品

现场检测,随身携带的诊断技术。

Pocket®Diagnostic LFD装置的注册商标为Forsite Diagnostics,直接在田间地头、温室,也可在实验室中或任何需检测的地点使用。Pocket®Diagnostic基于侧向流动免疫色谱层析技术,用于检测样品中某单一病原体。

方法:

只需0.2 g25 mm见方的小片植物叶片材料即可,如有可能,使用呈现症状的组织,不要使用死组织;植物的根则事先洗净土壤。组织在提取瓶中剧烈震荡30-60秒,直到提取缓冲液不再完全透明。

23滴裂解液到样品检测池上,在确认对照线(C)变为蓝色后(说明工作正常),判断检测线(T)颜色来确定是否含相应病原体。