DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针

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更新: 2020-08-03
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产品信息

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规格

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价格(元)

DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针

40758ES25

25mg

-20℃干燥避光保存

988.00

产品描述

DiIDiODiDDiR是一系列亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构,这是一类环境敏感型荧光染料,当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子(例如蛋白质,虽然在水中其荧光强度很弱)结合时,其荧光强度显著增强。这类染料具有很高的摩尔消光系数,极性依赖性的荧光和很短的激发寿命。

DiDDiI的衍生物,具有明显往红光迁移的激发和发射光谱,这一特性使其特别适合标记具显著自荧光效应的细胞或组织。DiD可被633nm的氦-氖(He-Ne)激光所激发,呈红色荧光,在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,进入细胞后,染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞染色。

产品性质

英文别名(English Synonym

DiIC18(5); 1,1-Dioctadecyl-3,3,3,3-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate

分子式(Formula

C61H99ClN2O4

分子量(Molecular Weight

959.91

Ex/Em(nm)

644/663

推荐滤光器

XF47-Omega, 31023-Chroma

外观(Appearance

红色或紫色或深蓝色固体

纯度(Purity

97%TLC

溶解性(Solubility

溶于DMFDMSO,甲醇

结构式(Structure

运输和保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品-20 oC干燥避光保存,有效期二年。

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

使用方法

1. 染色液制备

1)配置DMSOEtOH 储存液:储存液用 DMSOEtOH配置浓度15 mM

注】未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融。

2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSSPBS)稀释储存液,配制浓度为15 μM的工作液。

注】工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。

2. 悬浮细胞染色

1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL

237 孵育细胞 220min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。

3)孵育结束,按10001500 rpm离心5min

4)倾倒上清液,再次缓慢加入37预热的生长培养液重悬细胞。

5)重复(3),(4)步骤两次以上。

3. 贴壁细胞的染色

1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。

3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

437 孵育细胞 220min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。

5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片23次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育510min,然后吸干培养基。

4. 显微镜检测

1DiDDiODiIDiRDiS滤光器的选择参见表1

2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:

a) DiIDiOOmega XF52Chroma 51004

b) DiIDiDOmega XF92Chroma 51007

c) DiIDiODiDOmega XF93Chroma 61005

5. 流式细胞仪检测

DiODiIDiDDiR染色的细胞可分别用流式细胞仪的FL1FL2FL3FL4通道检测。

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货号

分子量

Ex/Em

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