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【免疫细胞无血清培养基(CIK) 用途与描述 】
免疫细胞无血清培养基，用于脐带血或外周血中分离到的单核细胞向CIK细胞（细胞因子诱导的杀伤细胞）的体外诱导及体外大规模扩增培养。
【免疫细胞无血清培养基(CIK) 规格与保存 】
| 2L培养体系免疫细胞无血清培养基套装： 适用于50mL外周血的样本量，使用2L培养基。 | ||||
| 产品名称 | 描述 | 规格 | 保存条件 | 保存期限 |
| 免疫细胞无血清 培养基(CIK) | 免疫细胞体外培养 | 1000mL/瓶*2 | 2-8℃保存 | 12个月 |
| CIK细胞诱导 因子试剂盒 | YC001起始培养时添加 | 1支 | -20℃保存 | |
| YC002接种24h后添加 | 1支 | |||
| YC003接种24h后添加 | 1支 | |||
| YC004接种24h后添加 | 1支 | |||
| YC005添加至培养基中使用，1支/L | 2支 | |||
| 3L培养体系免疫细胞无血清培养基套装：适用于100mL外周血的样本量，使用3L培养基。 | ||||
| 产品名称 | 描述 | 规格 | 保存条件 | 保存期限 |
| 免疫细胞无血清培养基(CIK) | 免疫细胞体外培养 | 1000mL/瓶*3 | 2-8℃保存 | 12个月 |
| CIK细胞诱导因子试剂盒 | YC001起始培养时添加 | 1支 | -20℃保存 | |
| YC002接种24h后添加 | 1支 | |||
| YC003接种24h后添加 | 1支 | |||
| YC004接种24h后添加 | 1支 | |||
| YC005添加至培养基中使用，1支/L | 3支 | |||
【免疫细胞无血清培养基(CIK) 使用方法】
1、采集与分离外周血采集外周血，Ficoll密度梯度离心分离收集单个核细胞。
2、单个核细胞的接种与诱导活化1) 0d时，绷胞计数。按细胞密度2x106cell/mL接种至对应体积的培养液中。 添加诱导因子YC001一支。添加10%比例的自体血浆。2) ld时(24小时)，添加诱导因子YC002、YC003、YC004至已经接种细胞的培养液中。 将YC005添加至未经使用的培养基中，待用。
3、细胞的连续培养与扩增1) 3d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同时添加新加入培养液体积l0%比例的自体血浆。补液比例大致 在1：2左右（原有培养液体积：新加培养液体积）2) 5d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。补液比例大致在1：3左右。3) 7d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。补液比例大致在1：2左右。4) 9d时，将剩余培养液全部加入。
4、收获细胞培养周期结束后，依据细胞量收获细胞。【供参考的补液程序范围】
2L培养体系补液体积示意表：50mL外周血，接种密度2.0x106 cell/mL。
| 天数 | 操作方式 | 原有培养液 体积/mL | 新加培养液 体积/mL | 培养液 总体积/mL | 血浆添加 /mL | 因子添加 | 备注 |
| 0d | 接种 | 0 | 25 | 25 | 2.5 | YC001 | T75瓶 |
| 1d | 诱导 | YC002 YC003/YC004 | |||||
| 3d | 补液 | 25 | 50 | 75 | 5 | 换瓶 T175瓶 | |
| 5d | 补液 | 75 | 225 | 300 | 转培养袋， 平分两袋 | ||
| 7d | 补液 | 300 | 700 | 1000 | 每袋补350mL | ||
| 9d | 补液 | 1000 | 1000 | 2000 | 每袋补500mL |
备注：1)补液后最优密度区间为(0.6-0.8)x106cell/mL。若按体积补液与最优密度区间有冲突的话，请以最优密度区间为准。2)纯粹按固定体积接种与补液并非不可，但应建立在丰富的样本量基础之上。3)外周血量少于50mL，应使用的补液程序，请联系本公司免费索取。
3L培养体系补液体积示意表：100mL外周血，接种密度2.0x106 cell/mL。
| 天数 | 操作方式 | 原有培养液 体积/mL | 新加培养液 体积/mL | 培养液 总体积/mL | 血浆添加 /mL | 因子添加 | 备注 |
| 0d | 接种 | 0 | 50 | 50 | 5 | YC001 | T175瓶 |
| 1d | 诱导 | YC002 YC003/YC004 | |||||
| 3d | 补液 | 50 | 100 | 150 | 10 |
| |
| 5d | 补液 | 150 | 450 | 600 | 转培养袋， 平分两袋 | ||
| 7d | 补液 | 600 | 1400 | 2000 | 每袋补700mL | ||
| 9d | 补液 | 2000 | 1000 | 3000 | 每袋补500mL |
备注：1)补液后最优密度区间为(0.6-0.8)x106cell/mL。若按体积补液与最优密度区问有冲突的话，请以最优密度区间为准。2)纯粹按固定体积接种与补液并非不可，但应建立在丰富的样本量基础之上。3)外周血量少于100mL，应使用的补液程序，请联系本公司免费索取。
【免疫细胞无血清培养基(CIK) 产品性能之外周血样本】
1. 细胞总数：125亿，折合62.5亿/L。
2、CD3+CD56+阳性率在25%-55%
3. 细胞支持密度更高。培养14天后，细胞密度可至5.7×106cell/mL。 培养15天后，细胞密度可至6.2×106cell/mL。
4. 培养后期补液结束后，细胞维持能力更强。最后一次补液（9d），持续至17天，细胞数量一直维持增长，未见明显下降。
【免疫细胞无血清培养基(CIK) 产品性能之脐带血样本】
50mL脐带血
细胞生长曲线
CIK细胞阳性率
