Gibco™ 全新CultureOne™ 添加剂 体验出众的神经细胞培养

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单价: 1800.00
品牌: Gibco
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更新: 2019-06-11
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货号: A3320201
供应商: 恒斐生物
数量: 现货
英文名: CultureOne™ Supplement (100X)
规格: 5ml
Gibco CultureOne添加剂可添加到任何传统用于神经元分化的培养基中,消除75%以上混入的神经前体细胞,以达到神经元细胞分布均匀、分化完全的卓越效果,从而改善下游检测、加速神经元成熟、稳定维持培养体系5周乃至更久。

神经元培养可维持5+周

CultureOne添加剂用于确保从人多能干细胞(hPSC)源神经干细胞(NSCs)分化的神经细胞在下游应用之中具有最高的利用率。

 
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实验数据

  • 改善下游检测
  • 加速神经元成熟
  • 出色的富集方法

CultureOne添加剂可以改善成像、RNA表达及电生理检测结果。相对于传统的分化方法,采用CultureOne添加剂分化2周后,成像结果显示神经细胞分布均匀(MAP2+),NSCs (SOX1+)和细胞结块减少75%以上(A)。这些细胞具有更高的神经元mRNA表达,更低的神经干细胞 mRNA表达(B),多电极阵列(MEA)测定时具有更高的发放频率。

A. 分化2周后呈像

传统分化

CultureOne添加剂

 

B. 2周后 qPCR测定mRNA表达

CultureOne添加剂的作用机制

 
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简单、易于扩展规模的神经元细胞培养实验方案

神经元分化培养基的经典配方(基于100 mL的终体积)

试剂 货号 体积
Gibco™ Neurobasal™ Medium 21103049 96 mL
Gibco™ B-27™ Supplement (50x) 17504044 2 mL
Gibco™ GlutaMAX™ Supplement (100x) 35050061 1 mL
Gibco™ CultureOne™ Supplement (100x) A3320201 1 mL
Ascorbic acid (200 mM, e.g., Sigma-Aldrich™ Cat. No. A8960) NA 100 µL
可将10-20 ng/mL的胶质细胞源神经营养因子(GDNF)和10-20 ng/mL脑源神经营养因子(BDNF)加入到神经元分化培养基(NDMC)之中,以提升由不同神经干细胞细胞系得到的神经元的存活率。

常规的两周神经干细胞分化方案所需的NDMC体积(采用CultureOne添加剂的神经元分化培养基)

多聚赖氨酸和层粘连蛋白包被的培养平板(孔数#) 孔表面积(cm2) 每孔建议的NSCs(5 x 104 细胞/cm2) NDMC之中的NSCs浓度(细胞/mL) 每孔铺盘的NSC/NDMC悬液体积(mL) 每孔的NDMC营养物体积(mL) 每孔总的NDMC营养物补充次数(每周饲养2-3次) 每板的总NDMC体积(mL) 每500 mL NDMC(对应1单位的CultureOne添加剂)对应的板数
96 0.32 16,000 160 0.1 0.1 5 57.6 8
48 0.95 47,500 238 0.2 0.2 5 57.6 8
24 1.90 95,000 190 0.5 0.5 5 72.0 6
12 3.80 190,000 190 1.0 1.0 5 72.0 6
6 9.60 480,000 240 2.0 2.0 5 72.0 6

采用CultureOne添加剂获得的细胞产量

在我们的实验室,在96孔板的每个孔中接种16,000个H9 胚胎干细胞源神经干细胞,并采用CultureOne添加剂分化2周后通常得到富集了的分化神经元约9000个,也就是神经干细胞起始数目的60%的数量。请注意,不同神经干细胞系的产量可能存在差异。

我们提供单独试剂形式的CultureOne添加剂,使您可轻松地搭配Gibco™神经细胞培养入门试剂盒,实现简单、易于扩展规模的出色神经元细胞培养。

订购信息

 
Catalog # Name Size 单价 (CNY) Qty
A3320201 CultureOne™ Supplement (100X) 5 mL
1,885.00
温馨提示:不可用于临床治疗。