Bst DNA聚合酶

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单价: 200.00
品牌: Belife
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更新: 2021-05-25
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货号: X10066
规格: 8000U/800U
浓度:8U/ul
储存条件:-20
热失活:80℃,20min
产品购买咨询:18511897367


简介:
Bst DNA据聚合酶是从Geobacillus中克隆得到的耐热DNA聚合酶。本产品缺失了5’-3’3’-5’的核酸外切酶活性,比传统链置换酶具有更强的链置换活动,从而使得本产品在等温扩增实验中表现更加的出色。本产品是通过大肠杆菌表达的重组酶,分子量大小为67kDa
单位定义:
1单位活力定义为在65℃,30min内,将25nmol dNTP掺入到酸不溶物质中所需要的酶量。
酶保存液成分:
10mM Tirs-HCl50mM KCl0.1mM EDTA50%甘油,pH7.1@25℃。
产品特点:
  1. 热稳定性高,最适反应温度为50-68℃。
  2. 抗逆性好,对非离子表面活性剂和高盐环境的耐受性高。
  3. 链置换活性高,无核酸外切酶活性。
酶蛋白性质描述:
蛋白纯度:>99%
酶活性:5000U/mg
宿主核酸残留:2000U酶中,未检出
单链核酸外切酶:2000U酶中,<2.0%
双链核酸外切酶:2000U酶中,<0.5%
双链核酸内切酶:2000U酶中,未检出
应用范围:
  1. 在二代测序(NGS)应用中,主要用于文库构建中的链置换反应。
  2. 其他等温扩增实验
  3. 应用于在纳克数DNA模板量条件下对其测序
  4. 应用于在GC含量较高DNA区域测序
试剂盒组分:
名称 规格1 规格2 规格3 其他
Bst DNA聚合酶 1600U 8,000U 80,000U 可定制
10*Bst Reaction buffer 0.7ml 3ml 30ml
100mM MgSO4 Solution 0.5ml 2ml 20ml
1*Bst Reaction buffer
20mM Tris-HCl 10mM (NH4)2SO4 50mM KCl 2mM MgSO4 0.1% Tween® 20 pH 8.8 @ 25
注:镁离子的反应浓度可在2-10mM之间调整。






使用方法:
 
成分 25ul体系 终浓度
10*Bst Reaction buffer 2.5ul 1×(包含2mM MgSO4
100mM MgSO4 Solution 1.5ul 6mM(总量8mM
dNTP mix10nM 3.5ul 1.4mM each
primer-125×) 1ul  
primer-225×) 1ul  
primer-325×) 1ul  
primer-425×) 1ul  
Bst DNA聚合酶 1ul 320U/ml
DNA template   10copies
Nuclease-free Water To25ul  
note
  1. 设置无模板阴性对照,保证扩增特异性。
  2. 对反应产物进行分析时,建议建立分离区域以避免污染。
  3. 若需要体系优化,请保证在Mg2浓度在4-10mM之间,Bst酶浓度在40-320U/ml之间,反应温度在50-68℃之间。
  4. Bst DNA聚合酶不能用于热循环测序和PCR
  5. Bst DNA聚合酶缺失5’-3’3’-5’的核酸外切酶活性。
温馨提示:不可用于临床治疗。