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份 库存999份
| 货号： | MT100 |
| 供应商： | 妙通生物 |
| 数量： | 99 |
| 保存条件： | 4℃ |
| 英文名： | Cell Counting Kit-8 |
| 保质期： | 1-2年 |
| 规格： | 500T |
Cell Counting Kit-8试剂盒（CCK-8）
产品简介：
Cell Counting Kit-8（CCK-8试剂盒）是检测细胞增殖、细胞存活和细胞毒性的试剂盒，是一种基于水溶性四唑盐的广泛应用快速高灵敏度检测试剂盒，为MTT法的替代方法，试剂盒中采用水溶性四唑盐在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan(参考图1)。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
CCK-8和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点：
★ 检测灵敏度更高，更易溶解，并且更加稳定；
★ 一次性加入，减少操作误差，方便快捷；
★ 水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞，减少离心丢失细胞的烦恼；
★ 无需放射性同位素和有机溶剂，细胞毒性低；
★ 酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响；
★ 无需预制，即开即用；
★ 适合于高通量药物筛选。
试剂盒使用说明：
1. 接种细胞悬液于96孔板中，100 µl /孔，每孔细胞数量>1000g。（如采用其它24/48孔板，培养体系中的溶液量和细胞数目按照比例扩大）。将培养板在培养箱预培养(在37℃，5% CO2的条件下稳定过夜或>5小时)。
2. 做细胞增殖实验时，向每孔加入10µl CCK- 8溶液（如果您采用24孔板或者其他容量的孔板，加入CCK-8溶液的量按比例增加，如400µl细胞培养体系中加入40µl CCK-8溶液），本步请注意不要生成气泡，气泡会影响折光系数影响O.D值)。
3. 将培养板在培养箱内孵育1.0-4小时(可间歇在酶标仪上测定，选择最佳的时间点)，一般细胞1-2小时合适（37℃，5% CO2的条件下）。
4. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度（OD值），以650nm为参考。
5. 如果暂时不测定O.D值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入1% w/v SDS溶液或者0.1 M HCl溶液10ul，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
注意事项：
- 由于使用96孔板进行检测，如细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS，无菌水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
- 细胞因培养时间较长，PH发生变化而培养基的颜色变化，建议加CCK-8试剂前更换新培养基。
- 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，如果待检测体系中存在较多的还原剂，例如一抗氧化剂会干扰检测，需设法去除。
- 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。
- 为了您的健康和安全，请穿实验服并戴一次性手套进行上述操作。
- 如要计算细胞具体数目，需同时做标准曲线，其方法是将密度较高（不超过107/ml数量级）的细胞按比例（一般是1/2，1/3）稀释后，一般要做4-5个细胞浓度梯度（最低的浓度细胞数目不低于每1000个，即104/ml），然后按照OD值绘制标准曲线。
保存条件：
4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存两年有效。
[VIP第1年] 指数:2
通过静安区市场监管局认证 
