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静镆 2017-05-10 10:47#2
Ryuboon
mix说明书上对各种模板都有量的要求，但是以cDNA为模板只是说不超过体积的十分之一，但是每个人提的cDNA浓度不一样，最后用的量也会有差异吧，很疑惑有没有大神解答一下小白的问题
我一般反转录模板量1ug mRNA，反转录以后荧光定量稀释5倍，10ul体系用2ul稀释液 -
Ryuboon 2017-05-10 11:05#3静镆
我一般反转录模板量1ug mRNA，反转录以后荧光定量稀释5倍，10ul体系用2ul稀释液翻转录后不用测一下cDNA浓度来确定加多少量吗？你这样是加了400左右？
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Ryuboon 2017-05-10 11:05#4
翻转录后不用测一下cDNA浓度来确定加多少量吗？你这样是加了400左右？
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Ryuboon 2017-05-10 11:06#5
静镆
我一般反转录模板量1ug mRNA，反转录以后荧光定量稀释5倍，10ul体系用2ul稀释液翻转录后不用测一下cDNA浓度来确定加多少量吗？你这样是加了400左右？
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静镆 2017-05-10 16:18#6
Ryuboon
翻转录后不用测一下cDNA浓度来确定加多少量吗？你这样是加了400左右？
差不多，我一般还是会测一下，但是，cDNA的浓度跟mRNA的模板浓度基本是一致的，加1ug的话最后差不多就是1ug/ul，你也可以测一下 -
5945笑笑 2017-11-18 09:53#7静镆
差不多，我一般还是会测一下，但是，cDNA的浓度跟mRNA的模板浓度基本是一致的，加1ug的话最后差不多就是1ug/ul，你也可以测一下请问我最近PCR效果不太好也测了一下，1ugmRNA,20ul逆转体系测出DNA是2000ng/ul
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静镆 2017-11-21 08:25#8
5945笑笑
请问我最近PCR效果不太好也测了一下，1ugmRNA,20ul逆转体系测出DNA是2000ng/ul
建议跑个电泳看一下RNA质量 -
5945笑笑 2017-11-21 11:16#9
静镆
建议跑个电泳看一下RNA质量好的，谢谢你。
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zx19940201 2018-03-15 16:01#105945笑笑
请问我最近PCR效果不太好也测了一下，1ugmRNA,20ul逆转体系测出DNA是2000ng/ul
请问1ugRNA是多少ul
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