腺相关病毒血清型众多(12种)，不同血清型对不同组织亲和性不同。因此在具体科学研究中，以下问题往往困扰着广大科研工作者：选择何种血清型？如何注射？注射多少病毒？注射部位如何选择？注射多久检测？

本文就常见的注射部位（大脑、视网膜、肝脏、心脏和动脉、肺脏、肾脏、肌肉、肠）和方法做一个简单的归纳，为大家提供一个概念和思路。

一、大脑

大脑组织常用血清型有 AAV1，AAV2，AAV5，AAV8 和 AAV9，其中神经组织常见的血清型有 AAV2，AAV5 和 AAV8。对大脑组织而言，AAV5 应用范围更广，AAV8 更有效（值得注意的是，在猴子的神经组织中，AAV5 更有效）。从作用效果上看，AAV8 大于 AAV1。

针对大脑组织不同部位，AAV 不同血清型靶向性有所差异：

1）海马组织：AAV9 比 AAV8 更有效；

2）神经组织不同的细胞，不同血清型靶向性不同：如神经元常用的血清型有AAV1、AAV2、AAV5 和 AAV9；星形胶质细胞和少突胶质细胞常用的血清型有 AAV1 和 AAV5 。

总体而言，在所有组织中，AAV2 适用性广且在脑部组织也有所体现，例如其可以达到大脑组织 75% 的区域。AAV2、AAV5、AAV8 和 AAV9 也比较常见，应根据不同组织进一步慎重选择，在此介绍几种特例：

1、肠神经系统(Enteric Nervous System ENS)，是由神经细胞组成的复杂网络，遍布整个肠胃消化管道。其神经元的数量和脊髓相当(约1亿个神经细胞)。该神经系统在人体躯干下部，属于迷走神经，以薄层的形式分布于消化肌之间，调节消化。常用 AAV5、AAV6、AAV8 和 AAV9 ，AAV6 对肠神经胶质和神经元有一定的靶向性。注射部位可以选择降结肠，注射量和滴度： 滴度为 1.3 × 10^12 GC/ml的病毒注射 5 μl 即可。检测时间：注射后 2 周开始表达，2-6 周均有检测。

2、脑组织常见的血清型为 AAV9，注射方法：左心室注射或者侧脑室注射。注射剂量和滴度：选择滴度为 0.5–4.0×10^11 GC/ml 的病毒液，稀释成 100 μl ，注射两周之后(14d) 开始检测。

二、视网膜

视网膜组织常用血清型有 AAV1、 AAV2 和 AAV5 。视网膜组织由于其特殊性，因而有自身的特点：注射成功率 20-30%，容易造成视网膜炎症和损伤，注射完需要使用 1% 阿托品（和少量新霉素、多粘菌素B硫酸盐和地塞米松眼膏施用于眼睛，延长瞳孔扩张时间，减少腺体分泌，减少炎症反应），连续使用 3-5 d 。其常用的注射量为 0.5 μl ，病毒滴度 1.5x10^7 GC/ml 。常用注射方法：视网膜下注射或者玻璃体注射。

但不同血清型又有不同特点：AAV1 主要作用于视网膜上皮细胞，注射后 2-4 周可以检测；AAV2 主要作用于感光细胞、视网膜上皮细胞和玻璃体，AAV2 玻璃体注射后分布广泛，2-4 周可以检测； AAV5 可作用于视网膜上皮细胞和感光细胞，在感光细胞中表达 AA5>AAV2，2-4 周检测。

三、肝脏

AAV2、AAV5、AAV7 和 AAV8，其中 AAV7 和 AAV8 的效率是 AAV2 的 10-100 倍。注射部位常选择门静脉、外周静脉和尾静脉。注射病毒滴度一般选择 8×10^10-2×10^12(GC/kg)（人、灵长类）；1×10^11 GC/只鼠，稀释成 50-100 μl 进行尾静脉注射；注射 2 周之后可以检测。

对心脏和动脉而言，常用血清型有：AAV1、AAV6、AAV8 和 AAV9 。其中 AAV2、AAV5、AAV7 也可以使用，但是表达比较慢，3 个月后表达量才能与 AAV1、AAV6 表达量相当。所有血清型中 AAV8 和 AAV9 最有效，2 个月左右其表达量达到最高。

常见的注射部位为冠状动脉、主动脉、心肌和尾静脉。注射病毒滴度为 1.9×10^11-10^12 GC/ml，稀释成 100 μl- 250 μl（大鼠剂量稍高于小鼠）注射；但是对于心脏原点注射而言，常采用 10^10 GC/ml 病毒滴度，稀释成 20 μl 使用。检测时间：一般在2周之后可以检测。

四、肺脏

肺脏常用血清型有 AAV1、AAV2、AAV5、AAV6 和 AAV9。由于肺脏表面唾液酸受体分布比较多，因此 AAV5 型比较常用；相比之下 AAV2 和 AAV6 转导效率相当。常见的注射方式有滴鼻、雾化吸入或气管内注射，注射病毒滴度为 10^12 GC/ml ，稀释成 3 μl，注射完之后 2 周可以检测表达情况。

五、肾脏

肾脏常用血清型有 AAV2、AAV8 和 AAV9。注射病毒的滴度一般选择 1-5×10^11 GC/ml，稀释成 50-200 μl 注射。常见的注射部位有肾动脉、肾静脉和左髂脉、腹主动脉，注射完 2 周之后可以检测表达情况。

六、肌肉

肌肉组织常用血清型有 AAV2、AAV8 和 AAV9。其中 AAV8、AAV9 最常用，心肌、胰腺和肾上腺也是如此。骨骼肌分为快速和慢速肌纤维，AAV2 常作用于慢速肌纤维，AAV6 则对二者都有效。对不同年龄阶段的鼠，注射剂量有所不同：幼鼠选择的病毒量为 7×10^10-1.2×10^11 GC/g；成年鼠选择的病毒量为 3.5 ×10^11-7×10^12 GC/只；但是低剂量的 AAV9 不能到达所有心肌细胞。

七、肠

肠组织常用血清型有 AAV1、AAV2 和 AAV5。常见的注射方式有口服、灌肠、腹腔注射、肠系膜动脉注射。一般选择注射滴度 1×10^11 GC/ml ,稀释成 100 μl（PBS或者稀释液稀释）使用，注射 2 周后可以检测。

腺相关病毒血清型众多(12种)，不同血清型对不同组织亲和性不同。因此在具体科学研究中，以下问题往往困扰着广大科研工作者：选择何种血清型？如何注射？注射多少病毒？注射部位如何选择？注射多久检测？

本文就常见的注射部位（大脑、视网膜、肝脏、心脏和动脉、肺脏、肾脏、肌肉、肠）和方法做一个简单的归纳，为大家提供一个概念和思路。

一、大脑

大脑组织常用血清型有 AAV1，AAV2，AAV5，AAV8 和 AAV9，其中神经组织常见的血清型有 AAV2，AAV5 和 AAV8。对大脑组织而言，AAV5 应用范围更广，AAV8 更有效（值得注意的是，在猴子的神经组织中，AAV5 更有效）。从作用效果上看，AAV8 大于 AAV1。

针对大脑组织不同部位，AAV 不同血清型靶向性有所差异：

1）海马组织：AAV9 比 AAV8 更有效；

2）神经组织不同的细胞，不同血清型靶向性不同：如神经元常用的血清型有AAV1、AAV2、AAV5 和 AAV9；星形胶质细胞和少突胶质细胞常用的血清型有 AAV1 和 AAV5 。

总体而言，在所有组织中，AAV2 适用性广且在脑部组织也有所体现，例如其可以达到大脑组织 75% 的区域。AAV2、AAV5、AAV8 和 AAV9 也比较常见，应根据不同组织进一步慎重选择，在此介绍几种特例：

1、肠神经系统(Enteric Nervous System ENS)，是由神经细胞组成的复杂网络，遍布整个肠胃消化管道。其神经元的数量和脊髓相当(约1亿个神经细胞)。该神经系统在人体躯干下部，属于迷走神经，以薄层的形式分布于消化肌之间，调节消化。常用 AAV5、AAV6、AAV8 和 AAV9 ，AAV6 对肠神经胶质和神经元有一定的靶向性。注射部位可以选择降结肠，注射量和滴度： 滴度为 1.3 × 10^12 GC/ml的病毒注射 5 μl 即可。检测时间：注射后 2 周开始表达，2-6 周均有检测。

2、脑组织常见的血清型为 AAV9，注射方法：左心室注射或者侧脑室注射。注射剂量和滴度：选择滴度为 0.5–4.0×10^11 GC/ml 的病毒液，稀释成 100 μl ，注射两周之后(14d) 开始检测。

二、视网膜

视网膜组织常用血清型有 AAV1、 AAV2 和 AAV5 。视网膜组织由于其特殊性，因而有自身的特点：注射成功率 20-30%，容易造成视网膜炎症和损伤，注射完需要使用 1% 阿托品（和少量新霉素、多粘菌素B硫酸盐和地塞米松眼膏施用于眼睛，延长瞳孔扩张时间，减少腺体分泌，减少炎症反应），连续使用 3-5 d 。其常用的注射量为 0.5 μl ，病毒滴度 1.5x10^7 GC/ml 。常用注射方法：视网膜下注射或者玻璃体注射。

但不同血清型又有不同特点：AAV1 主要作用于视网膜上皮细胞，注射后 2-4 周可以检测；AAV2 主要作用于感光细胞、视网膜上皮细胞和玻璃体，AAV2 玻璃体注射后分布广泛，2-4 周可以检测； AAV5 可作用于视网膜上皮细胞和感光细胞，在感光细胞中表达 AA5>AAV2，2-4 周检测。

三、肝脏

AAV2、AAV5、AAV7 和 AAV8，其中 AAV7 和 AAV8 的效率是 AAV2 的 10-100 倍。注射部位常选择门静脉、外周静脉和尾静脉。注射病毒滴度一般选择 8×10^10-2×10^12(GC/kg)（人、灵长类）；1×10^11 GC/只鼠，稀释成 50-100 μl 进行尾静脉注射；注射 2 周之后可以检测。

对心脏和动脉而言，常用血清型有：AAV1、AAV6、AAV8 和 AAV9 。其中 AAV2、AAV5、AAV7 也可以使用，但是表达比较慢，3 个月后表达量才能与 AAV1、AAV6 表达量相当。所有血清型中 AAV8 和 AAV9 最有效，2 个月左右其表达量达到最高。

常见的注射部位为冠状动脉、主动脉、心肌和尾静脉。注射病毒滴度为 1.9×10^11-10^12 GC/ml，稀释成 100 μl- 250 μl（大鼠剂量稍高于小鼠）注射；但是对于心脏原点注射而言，常采用 10^10 GC/ml 病毒滴度，稀释成 20 μl 使用。检测时间：一般在2周之后可以检测。

四、肺脏

肺脏常用血清型有 AAV1、AAV2、AAV5、AAV6 和 AAV9。由于肺脏表面唾液酸受体分布比较多，因此 AAV5 型比较常用；相比之下 AAV2 和 AAV6 转导效率相当。常见的注射方式有滴鼻、雾化吸入或气管内注射，注射病毒滴度为 10^12 GC/ml ，稀释成 3 μl，注射完之后 2 周可以检测表达情况。

五、肾脏

肾脏常用血清型有 AAV2、AAV8 和 AAV9。注射病毒的滴度一般选择 1-5×10^11 GC/ml，稀释成 50-200 μl 注射。常见的注射部位有肾动脉、肾静脉和左髂脉、腹主动脉，注射完 2 周之后可以检测表达情况。

六、肌肉

肌肉组织常用血清型有 AAV2、AAV8 和 AAV9。其中 AAV8、AAV9 最常用，心肌、胰腺和肾上腺也是如此。骨骼肌分为快速和慢速肌纤维，AAV2 常作用于慢速肌纤维，AAV6 则对二者都有效。对不同年龄阶段的鼠，注射剂量有所不同：幼鼠选择的病毒量为 7×10^10-1.2×10^11 GC/g；成年鼠选择的病毒量为 3.5 ×10^11-7×10^12 GC/只；但是低剂量的 AAV9 不能到达所有心肌细胞。

七、肠

肠组织常用血清型有 AAV1、AAV2 和 AAV5。常见的注射方式有口服、灌肠、腹腔注射、肠系膜动脉注射。一般选择注射滴度 1×10^11 GC/ml ,稀释成 100 μl（PBS或者稀释液稀释）使用，注射 2 周后可以检测。